液相色譜分析，如何高效解決“煩人“的溶劑效應

溶劑效應（solvent effect）亦稱“溶劑化作用"，指液相分析中，溶劑的物理和化學性質影響反應平衡和反應速度的效應，可能造成色譜峰展寬、分叉、保留時間漂移、峰面積變化，雙峰等現象。與此同時，較早洗脫的峰出現前延或分叉。

案例一：藥企碰到的液相色譜困境

某制藥企業生產的塞來昔布，是目前全球處方量最大的非甾體類抗炎鎮痛藥（NSAIDs）。企業參考美國藥典論壇方法，建立了塞來昔布雜質D的HPLC-UV測定法，對塞來昔布膠囊中可能存在的雜質D進行檢測，可以更好的控制塞來昔布及其制劑的產品質量。

實驗結果：

參考美國藥典色譜條件，在液相色譜儀上進樣雜質D對照品溶液，結果顯示雜質D峰出現峰前延。

考慮到樣品配制用溶劑和流動相不一致，存在樣品溶液與流動相的兼容性問題，可能引起溶劑效應。為證明溶劑效應的存在，改用流動相稀釋雜質D對照品溶液，在相同儀器上重新進樣，結果顯示雜質D峰形正常。

用流動相溶解樣品，帶來的困擾

表面上，采用流動相溶解樣品后，“煩人"的溶劑效應問題解決了。可是，卻給企業帶來了新困擾？

困擾1：藥典或國標等部門制定的方法不能隨意改變，更換樣品溶劑通常認為是對方法的改變，一般不被允許，如要改變，必須通過一系列復雜的方法學驗證之后才可以。

困擾2：塞來昔布雜質D對照品價格極其昂貴，100mg近萬元，改為用流動相溶解樣品后，由于流動相中有水，配置的標準品極易長菌，保質期非常短，而且樣品不穩定。這樣企業需要頻繁的配置，會造成標準品的浪費，檢測成本也無形中提高了。

困擾3：改為用流動相溶解樣品后，原本一年才配置一次標準曲線，現在不到半個月就需要配置一次。原本已經飽滿的實驗室工作，現在又額外增加不少工作量，勞心費力。

溶劑效應消除器，小配件大作用

使用溶劑效應消除器后，沒想到，幾千元的小配件（可以使用3-5年，每天不到1元錢），解決了藥企的煩惱，不用改變色譜條件，而且解決了溶劑效應問題。

將溶劑效應消除器接于液相色譜進樣器與色譜柱之間，參考美國藥典論壇色譜條件進樣雜質D對照品溶液。結果顯示雜質D峰形正常。

注：圖譜來源于廣州匯元醫藥科技有限公司

注：以上僅是眾多藥物分析中一個案例。我們翻看2020版中國藥典，不少品種（比如：2020版二部P630 妥布霉素），為避免分析中出現溶劑效應，不得已采取了流動相或純水溶解，

有了溶劑效應消除器后，就可以使用保存期更長或溶解性更好的甲醇或乙腈來溶解，就可以避免上述藥企出現的困境。

案例二：氮吹溶劑置換，帶來的困擾

GB 31656.8-2021水產品中有機磷農藥的測定，按照國標的操作，檢測工作者遇到了以下困擾：

氮吹溶劑置換，帶來的困擾

困擾1：國標的前處理過程非常繁瑣，樣品提取后，45℃氮吹，由于有機磷農藥易揮發，溫度不能太高，氮吹時間差不多2-3小時。如此漫長的氮吹，實在無法忍受。（注：樣品中有機磷農藥的含量比較高，之所以需要氮吹，主要目的是為了溶劑置換，避免分析過程中的溶劑效應）

困擾2：氮吹不能全吹干，否則有機磷農藥的回收率受到較大影響。可是，吹至近干，一方面時間非常不好控制，快到最后一些時，需密切關注氮吹過程。另一方面，即使吹至是近干，還是一部分有機磷農藥的回收率會受到一些影響。

溶劑效應消除器，省去了漫長的氮吹

加裝溶劑效應消除器后，大大的簡化了前處理步驟，無需溶劑置換，可省去氮吹過程（2-3小時），過濾膜后直接進樣。而且，部分有機磷農藥的回收率較大提高了。

有了溶劑效應消除器神器后，客戶在后續的一個課題中，還應用了溶劑效應消除器發表了一篇不錯的文章（文章發表中，暫不透露）

省去氮吹，過濾膜后直接進樣的對比圖

注：以上圖譜來源于某國家檢測單位

注：如果在分析中用流動相溶解樣品不好，只能使用純甲醇或純乙腈來溶解樣品，此時更應使用溶劑效應消除器，解決分析中溶劑效應的問題。

比如：最近比較熱的全氟化合物的分析，用流動相溶解樣品后，發現長鏈化合物基本沒有響應，經過反復試驗，才發現長鏈PFAS用流動相溶解不好，改為純甲醇后，能實現充分溶解。可是，上機分析時，又出現明顯的溶劑效應問題。此時，加裝溶劑效應消除器后可較好解match決這個問題。

溶劑效應消除器

歷時5年潛心打磨和研發的新產品，可有效解決樣品溶劑與流動相匹配性不好而產生的各類色譜問題：

• 大程度降低樣品溶劑和流動相差異所產生的色譜分析問題

• 顯著改善峰形、提高柱效

• 色譜基線更平穩、出峰時間更穩定

• 提高分離度和雜質檢出能力

（譜寧發明zl，zl號: 201510005647.8）